Terapia con Stem Cells en neumonía

Tema: Las células madre mesenquimales mejoran la supervivencia y el aclaramiento de bacterias en murino Escherichia coli neumonía

Tipo de Stem Cells: Células madre mesenquimales (MSCs) singénicas de ratones (médula ósea) 

¿Cómo fue obtenido?: kits de ELISA (R&D)

Resultados: 

• El tratamiento con MSC mejoran la supervivencia y el fenotipo de la E coli.
• MSC reducen la gravedad de la lesión pulmonar en el E coli 
• El bloqueo de la lipocalina 2 inhibe la actividad antibacteriana in vivo en de MSCs.
• Co-cultivo de MSCs estimuladas con LPS y los macrófagos alveolares aumenta la producción de lipocalina 2

Bibliografía:

Gupta N, Mouded M, Tan X. Las células madre mesenquimales mejoran la supervivencia y el aclaramiento de bacterias en murino Escherichia coli neumonía. 2012 (actualizado en 2012; acceso el 08 de Junio de 2017) Disponible en: http://thorax.bmj.com/content/67/6/533

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Animal transgénico en neumonía

Tema: La sobreexpresión de sICAM-1 en el espacio del epitelio alveolar resultado una respuesta inflamatoria exagerada y muerte prematura en bacterias Gram negativo neumonía 

Tipo de animal transgénico: Ratón transgénico (SPC-sICAM-1)  

Método de obtención: Clonación múltiple, Ultra-Turrax T8 homogeneizador, fecundación in vitro 

Uso: Llegar a la conclusión de que el alveolar sICAM-1 modula la inflamación pulmonar.y la manipulación de ICAM-1 puede modular la respuesta del huésped a infecciones pulmonares  Gram negativas..

Bibliografía:

Mendez M., Du M, Lin Y. Curtis J.  La sobreexpresión de sICAM-1 en el espacio del epitelio alveolar resultado una respuesta inflamatoria exagerada y muerte prematura en bacterias Gram negativo neumonía. Respiratory Research. 2011 (actualizado el 19 de diciembre de 2011: acceso el 08 de Junio de 2017) Disponible en: https://respiratory-research.biomedcentral.com/articles/10.1186/1465-9921-12-12

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ADN recombinante en la naturaleza y ADN recombinante artificial en neumonía

 ADN recombinante artificial en neumonía

Tema: Familias de la proteina de superficie PspA de Streptococcus pneumoniae. relación con serotipos y localizacion

Objetivo: Identificar las familias de PspA de aislamientos de pacientes de nuestra región y relacionarlas con los serotipos prevalentes y patologías.

Gen: PspA

Enzima de restricción: LSM12/ SKH63 y LSM12/SKH52

Enzima ligasa: 23 F

Vector: Spn ATCC R36A

Célula receptora: Cultivos de Streptococcus pneumoniae (Spn)

Método de inserción del gen: Método de transformación; Tris buffer

Método de identificación: PCR, electroforesis

ADN recombinante en la naturaleza 

Tema: Ingeniería genética o tecnología del ADN recombinante

Objetivo: Hoy es posible crear moléculas recombinantes entre segmentos de ADN que no presentan homología y que pueden proceder de organismos diversos. Con el uso coordinado de las enzimas de restricción y de los vectores moleculares, es posible aislar una secuencia de ADN de cualquier organismo e inserirla en el ADN de otro. Las formas vivas que han sufrido tal transformación y que contienen un ADN extraño son llamadas transgénicas.

Gen: Gen amp, Gen tet

Enzima de restricción: PstI, BamHI y SalI 

Enzima ligasa: No se especifica 

Vector: Vector híbrido 

Célula receptora: Célula bacteriana

Método de inserción del gen: Método de transformación 

Método de identificación: Electroforesis

Bibliografía: 

Società Scientifica di Nutrizione Vegetariana.  Ingeniería genética o tecnología del ADN recombinante (actualizado 29 de Julio de 2015; acceso el 26 de Mayo de 2017) Disponible en:  https://ivu.org/spanish/trans/ssnv-genetic.html

C.Mayoral, M.Bianca, M.Baroni, R.Giani, M.Regueira, F.Zalazar. Familias de la proteína de superficie PspA de Streptococcus pneumoniae.(actualizado el 24 de junio de 2010, acceso el 13 de junio de 2015). Disponible en: http://www.scielo.org.ar/pdf/medba/v70n5/v70n5a07.pdf

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Técnica de microrray en neumonía

Tema: Los pacientes intubados que presentan traqueobronquitis o neumonía tienen patrones distintivos de expresión genética del sistema del complemento en el período previo a la infección: un estudio piloto

Objetivo: Identificar y comparar la expresión de genes VAP / IVA “firmas” utilizando microarrays de ADN de todo el genoma.

Muestra: Secreciones traqueales, sangre

Tipo de ácido nucleico a ser extraído: ARN total

Extracción de ADN

• Lisis: Sistema PAXgene Blood RNA 
• Purificación: Sistema PAXgene Blood RNA 
• Separación: Sistema PAXgene Blood RNA 

Genes a amplificar: Cyanine 3-CTP-cRNA marcado

Tipo de prueba: Microarrays de ADN

Visualización: Análisis IPA

• Desnaturalización: GeneSpring GX 11.0
• Hibridación: GeneSpring GX 11.0
• Extensión: GeneSpring GX 11.0
• Numero de ciclos: GeneSpring GX 11.0

Bibliografía: 

Loeches, Papiio, Amansa.  Intubated patients developing tracheobronchitis or pneumonia have distinctive complement system gene expression signatures in the pre-infection period: A pilot study

[actualizada el 4 de Mayo de 2012, acceso el 20 de Mayo de 2017]. Disponible en: http://www.medintensiva.org/en/intubated-patients-developing-tracheobronchitis-or/articulo/S2173572712000768/

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Prueba de PCR en neumonía

Tema: Detección por PCR múltiple de gérmenes atípicos en pacientes con neumonía adquirida de la comunidad

Objetivo: La detección simultánea, mediante métodos moleculares, a M. pneumoniae, C. pneumoniae y L. pneumophila en muestras respiratorias de pacientes con neumonía adquirida en la comunidad, y describir los gérmenes comunes aislados por métodos microbiológicos convencionales

Muestra: Esputo, secreción faríngea y lavado broncoalveolar 

Tipo de ácido nucleico a ser extraído: ADN bacteriano

Extracción de ADN:

• Lisis: Kit comercial Wizard Genomics
• Purificación: Kit comercial Wizard Genomics
• Separación: Kit comercial Wizard Genomics

Genes a amplificar: OMP o la proteína 60-kDa16S, rRNA.

Número de pares de bases: 352 pares de bases en M. pneumoniae, 333 pares de bases en C. pneumoniae y 233 pares de bases en L. pneumophila.

Tipo de PCR: PCR Múltiple

Visualización: Electroforesis

• Desnaturalización: Técnica de Mejuto y colaboradores
• Hibridación: 55°C y la Técnica de Mejuto y colaboradores
• Extensión: Técnica de Mejuto y colaboradores
• Numero de ciclos: Técnica de Mejuto y colaboradores

Bibliografía: 

Guillén R., Franco R., Franco L., Moraga P., Ojeda M., Russomando. Detección por PCR múltiple de gérmenes atípicos en pacientes con neumonía adquirida de la comunidad que concurrieron al INERAM. SCielo. (actualizado en Junio de 2012; acceso el 13 de Mayo de 2017) Disponible en: http://scielo.iics.una.py/scielo.php?pid=S1812-95282012000100004&script=sci_arttext

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Pruebas de tamizaje y confirmatorias en neumonía

Pruebas de tamizaje 

Las pruebas de tamizaje ayudan a detectar una enfermedad de manera rápida pero no con un diagnóstico definitivo. La principal prueba de tamizaje para detectar la neumonía es la radiografía de tórax, al igual que otras técnicas, como el auscultamiento, para una evaluación de signos característicos de la neumonía,  como por ejemplo la dificultad de respirar o respiración apresurada.

Pruebas confirmatorias 

Las pruebas confirmatorias se emplean para llegar a un diagnostico definitivo de la enfermedad.

En el caso de la neumonía, se puede realizar las siguientes pruebas:

Hemocultivos: Los principales agentes bacterianos que se asocian con la neumonía son Streptococcus pneumoniae, Haemophilus influenzae, y Klebsiella pneumoniae. Al igual se puede realizar un cultivo de líquido pleural si hay presencia de rodeando a los pulmones. También se puede hacer una tinción de Gram y cultivo de esputo para buscar estas bacterias o virus que están causando los síntomas.

Tomografía computarizada del tórax: Es un método imagenológico que utiliza rayos X para crear imágenes trasversales del tórax y la porción superior del abdomen.

Gasometría arterial: Sirve para identificar si hay una suficiente cantidad de oxígeno en sangre en los pulmones.

Conteo sanguíneo completo para verificar el conteo de glóbulos blancos.

Bibliografía:

Lifshitz Alisa. Neumonía. Pulmonía. Vida y salud. [actualizada en 2012, acceso el 06 de Mayo de 2017]. Disponible en: http://www.vidaysalud.com/salud-de-a-a-z/enfermedades-y-condiciones/neumonia-pulmonia/

Chow Susan. Diagnosis de la neumonía. News Medical Lifescience [actualizada en 11 de octubre de 2015, acceso el 06 de Mayo de 2017]. Disponible en: http://www.news-medical.net/health/Pneumonia-Diagnosis-%28Spanish%29.aspx

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Alteraciones de la epigenética en la neumonía

El concepto de epigenoma incluye todos aquellos procesos que alteran la expresión de genes sin cambiar la secuencia del ADN, dichos cambio se transmiten a las células hijas.  

Principalmente existen las alteraciones epigenómicas hacia un sistema inmune directamente.

Algunos fenómenos epigenéticos que aumentan el riesgo de neumonía incluyen: 

- Infección por bacterias virus y hongos.

- La contaminación del aire ha sido identificada como un factor potencial de riesgo.

- El hábito tabaquismo materno durante el embarazo también aumenta el riesgo en  el niño, a través de mecanismos epigenéticos. El estrés psicológico materno aumenta los niveles de IgE en el cordón umbilical. Es posible que este fenómeno se relacione con supresión de la producción de citoquinas Th-1 por trofoblastos de la placenta y con el desarrollo del sistema inmune.

- La exposición a contaminación intradomi-ciliaria más que duplica el riesgo de neumonía. Hay otros contaminantes, especialmente el humo de tabaco.

Los mecanismos epigenéticos como la metilación del DNA y la modificación de histonas (como la acetilación, metilación, fosforilación y ubiquitinación), sirven como señales reconocidas por complejos que modifican la estructura de la cromatina, dando lugar a cromatina transcripcionalmente activa o no.

Bibliografía:

Gavidia Tania. Pronczuk Jenny. Sly Peter. Impactos ambientales sobre la salud respiratoria de los niños. Carga global de las enfermedades respiratorias pediátricas ligada al ambiente.  Scielo. Revista chilena de pediatría . [actualizada en 2012, acceso el 29 de Abril de 2017]. Disponible en: http://www.scielo.cl/scielo.php?pid=S0717-73482009000200006&script=sci_arttext

Learn Genetics. Epigenetics & Inheritance. Genetic Science Learning Center . [actualizada en 2013, acceso el 29 de Abril de 2017]. Disponible en: http://learn.genetics.utah.edu/content/epigenetics/inheritance/

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Alteraciones en la traducción de la neumonía

En la traducción del streptococcus pneumoniae se toma en cuenta la cápsula alrededor de ella se realiza este proceso y aparte en cual se trata de impedir la acción de diferentes antimicrobianos para permitirle tener una resistencia hacia ellos, como a los betalactámicos, macrólidos,azálidos y fluroquinolasas. Los genes que codifican los polisacáridos de la capsula se encuentran organizados en un operón y permiten la traducción de dos proteínas WZD/wze.

Lo que se busca son péptidos de acción inhibitoria que provoquen la deslocalización de los genes o la interferencia de la interacción WZD/wze cuando se expresan mediante un plásmido.

Bibliografía: 

Padro Pricilla, Perret Cecilia. Streptococcus Pneumoniae resistencia en pediatría.  Scielo. Revista chilena de pediatría . [actualizada el 21 de enero de 2011, acceso el 23 de Abril de 2017). Disponible en:  http://www.scielo.cl/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0370-41062001000100009

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Alteraciones en la transcripción de la neumonía

El gen gyrA codifica la subunidad A del ADN del streptococcus pneumoniae. 
La región que contiene el promotor de gyrA posee una curvatura intrínseca y esta  actúa como un represor. De hecho que su presencia disminuye la eficiencia de la transcripción. 

La transcripción de gyrA tiene un promotor independiente, y es estimulada por la relajación del ADN, lo que se denomina respuesta RST (estimulación de la transcripción mediada por relajación) que depende de la curvatura intrínseca.

Bibliografía:

Patricio Jiménez. Diagnostivo de la neumonía del adulto adquirida en la comunidad. Universidad Asutral de Chile [actualizada el 14 de Agosto de 2015,  acceso el 15 de Abril de 2017] Disponible en: http://www.scielo.cl/scielo.php?pid=S0716-10182005000400005&script=sci_arttext

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Alteraciones en la Replicación de la Neumonía

Coronavirus es uno de los virus de la neumonía atípica, este comienza con la entrada a la célula, momento en que pierde su envoltura y el genoma de ARN es depositado en el citoplasma. Una vez ahí, este virus se presenta de una manera muy similar al ARN mensajero del huésped, esto permite que el ARN se adhiera a los ribosomas para su traducción.

También cabe mencionar que la replicación de este virus posee una elevada tasa de mutación y recombinación genética.

La recombinación genética de este virus es favorecido por una enzima, la polimerasa viral. Esta enzima es la responsable de copiar el ARN para producir nuevos ARNs que conformarán parte del genoma de la descendencia del virus y transcribir en forma discontinua el ARN genómico, para así poder infectar la especie.

Bibliografía:

Irma López Martínez. Influenza, Influenza A (H1N1), INFLUENZA A (H7N9). Universidad Autonoma Nacional de México. [actualizada el 24 de Septiembre de 2015, acceso el 09 de Abril de 2017). Disponible en: http://www.facmed.unam.mx/deptos/microbiologia/virologia/influenza.html

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Evento de la Universidad Central del Ecuador

Si vas o deseas  asistir al evento por las fiestas de la Universidad Central del Ecuador, revisa el siguiente link para más información.

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Neumonía

La neumonía es una infección del pulmón o pulmones que puede ser producida por múltiples microorganismos, ya sean bacterias, virus y hongos.

Puede ser adquirida en diferentes ambientes llegando a ser una neumonía adquirida en la comunidad (en el día a día de una persona) o neumonía hospitalaria (en un centro sanitario).

Cualquier persona puede padecer neumonía,ya que los factores que la producen son muy diversos. Por ejemplo, en personas sanas, la neumonía más común es la producida por una bacteria llamada neumococo.

Es la sexta causa de muerte en los países desarrollados y puede llegar a un número entre 7 y 15 casos por cada 1.000 personas al año.

Bibliografía:

Campo Arantza. Neumonía. Clínica Universidad de Navarra. [actualizada en 2015, acceso el 31 de Marzo de 2017). Disponible en: http://www.cun.es/es_EC/enfermedades-tratamientos/enfermedades/neumonia

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Mensaje de bienvenida

Bienvenidos lectores a mi blog.

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Cristian Carcelén

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